DMD期刊发表：寡核苷酸药物多种体外代谢体系优化及其体内外相关性研究

4月29日，药明康德DMPK代谢产物鉴定团队在药物代谢领域权威期刊Drug Metabolism and Disposition上发表了题为“Comparative Metabolism of a GalNAc-Conjugated siRNA, Inclisiran, Among Various In Vitro Systems and Correlations with In Vivo Metabolism in Rats”的文章，该研究系统评估了GalNAc偶联siRNA药物Inclisiran在不同体外模型中的代谢特征，成功优化出可模拟体内代谢的模型，为寡核苷酸药物的代谢研究及研发提供了重要指引。为了助力寡核苷酸药物研发进展，此文章免费向所有人开放（文末可访问），本文将提供此文章亮点概览。

GalNAc-siRNA代谢研究中的关键挑战

GalNAc（N-乙酰半乳糖胺）偶联技术是当前小干扰RNA（siRNA）药物实现肝靶向递送的核心策略，目前被批准用于临床的7个siRNA药物中有6个采用GalNAc偶联策略。代谢稳定性是GalNAc-siRNA研发的重要考量因素，直接影响药物的疗效与安全性。然而，如果直接采用传统体外模型进行体外代谢研究，通常表现出显著的体内外差异，或缺乏相关性比较，或可重复性差。业内长期缺乏可靠的体外评估模型，可能导致药物开发周期延长和成本升高。

研究亮点与突破性发现

研究使用已获批的GalNAc-siRNA药物Inclisiran为模型化合物，根据GalNAc-siRNA从给药到肝细胞内吞和组成RNA诱导沉默复合体（RISC）的过程，选择对应的生理相关的体外基质，并模拟生理条件，系统地研究了肝素/EDTA抗凝血浆、血清、肝匀浆（不同pH缓冲液）、S9组分、溶酶体、细胞质及贴壁肝细胞等体外模型的代谢特征，并与SD大鼠体内血浆和肝脏代谢情况进行体外体内相关性（IVIVC）比较，选择并优化能模拟体内代谢的体外模型，重点发现如下。

血浆代谢模型优化

体外肝素抗凝血浆与血清能很好地模拟Inclisiran在血液中的核酸酶代谢路径，其代谢物谱与体内血浆高度一致，为早期药物的血浆稳定性评估提供了可靠工具。

肝脏代谢模型创新

1. 肝匀浆：在pH 6.0磷酸盐缓冲液中，肝匀浆可同时反映反义链（AS）的核酸酶代谢与正义链（SS）的GalNAc水解，代谢物谱与体内肝脏高度吻合。在pH 7.4的Tris-HCl缓冲液中，肝匀浆和细胞质能用于研究体内细胞质中核酸酶介导的寡核苷酸代谢。

2. 肝溶酶体：pH 5.0醋酸盐缓冲液中的肝tritosomes可特异性模拟Incliciran在体内肝溶酶体中的代谢，解决了传统溶酶体模型活性不足的难题。

3. 贴壁肝细胞：通过优化孵育条件和药物浓度，贴壁肝细胞成功复现了Inclisiran在肝细胞内的完整代谢路径。

跨物种验证

该研究进一步对比了大鼠、猴及人肝匀浆的代谢特征，发现三者代谢产物谱具有相似性。然而，研究在猴和人的肝脏中检测到了独特的脱氨代谢物（AS-NH+O），而在大鼠中未检测到。这提示，对于具有新结构修饰的新型寡核苷酸药物，开展跨物种的代谢研究对其安全性评估具有重要意义。

结语

本研究中，药明康德DMPK代谢产物鉴定团队通过自主开发的高分辨质谱代谢分析技术与体内外代谢相关性研究策略，突破了目前缺乏准确可靠的体外模型的困境，优化并建立了系列体外代谢模型，为寡核酸药物的结构优化、安全性评估及临床转化提供了关键工具。除了肝靶向寡核苷酸药物的体外代谢相关模型外，药明康德DMPK还建立了一系列肝外代谢的相关模型，如肾脏、脑、眼及肌肉等，为肝外靶向寡核苷酸药物的代谢研究和结构优化提供支持。

药明康德DMPK在寡核苷酸药物研究中积累了丰富的经验。我们提供全方位的ADME研究服务，涵盖体外和体内的成药性评估。服务涵盖血浆蛋白结合实验、体外代谢稳定性筛选、体内外代谢产物鉴定、啮齿动物和猴的药代动力学研究，以及PKPD（药代动力学/药效学）研究等。此外，我们拥有多样化的寡核苷酸药物定量分析能力，可以进行放射性同位素标记的物质平衡和组织分布研究。我们在研究策略、数据解读以及跨部门合作中具备突出优势，能有效地缩短寡核苷酸药物的开发周期。

药明康德DMPK依托中国（上海、苏州、南京和南通）和美国（新泽西）的研发中心，提供从早期筛选、临床前开发、到临床研究阶段的综合型药代动力学服务，助力您快速推进药物研发流程。拥有上千人的研发团队，服务超1600家全球客户，具有超过十五年的新药申报经验，已成功支持超过1700个新药临床研究申请（IND）。

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